技术路线
 

多抗技术路线

步骤

说明

备注

时间

1.项目准备

客户提供填写完整的抗体信息需求表,AbMART进行抗原设计

客户提供原材料:目标蛋白全长cDNA克隆;蛋白;多肽

《原材料QC结果汇报

客户提供质粒标准:

总量>50ng,体积>10ul

客户提供蛋白标准:
纯度>70%;量>5mg;浓度>0.5mg/ml

客户提供多肽标准:

多肽抗原(提供HPLC,MS报告)
纯度>80%;量>10mg(修饰性多肽和对照肽的量则为>12mg

项目起始前
(
包含测序)

2.抗原制备

蛋白抗原路线:

抗原合成;蛋白片段表达纯化;

多肽抗原路线:

多肽合成;多肽偶联

《蛋白抗原数据汇报》
(提供SDS-PAGE电泳图谱)

或《多肽抗原数据汇报》

蛋白抗原:

3

多肽抗原:

5

3.抗体制备

3.1动物免疫

免疫2只兔子 200ug/
(周期:1/2/2/(2)周)

 

8-10

3.2动物取血

第三(四)次免疫后取少量动物血清,用于ELISA检测

3.3抗体纯化

过去交叉柱及抗原亲和纯化

 

4.抗体验证

抗体最终验证(ELISA检测)

《抗体验证结果汇报》

1

5.客户获得

符合验证标准的纯化抗体20-50mg(蛋白抗原)/2mg(多肽抗原)/1mg(修饰性多肽);每条抗原多肽各1 mg(多肽抗原路线);抗体验证数据报告

 

合计

蛋白抗原路线:12-14

多肽抗原路线:14-16