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多抗技术路线
步骤
说明
备注
时间
1.项目准备
客户提供填写完整的抗体信息需求表,AbMART进行抗原设计
客户提供原材料:目标蛋白全长cDNA克隆;蛋白;多肽
《原材料QC结果汇报 》
客户提供质粒标准:
总量>50ng,体积>10ul;
客户提供蛋白标准: 纯度>70%;量>5mg;浓度>0.5mg/ml
客户提供多肽标准:
多肽抗原(提供HPLC,MS报告)纯度>80%;量>10mg(修饰性多肽和对照肽的量则为>12mg)
项目起始前(包含测序)
2.抗原制备
蛋白抗原路线:
抗原合成;蛋白片段表达纯化;
多肽抗原路线:
多肽合成;多肽偶联
《蛋白抗原数据汇报》(提供SDS-PAGE电泳图谱)
或《多肽抗原数据汇报》
蛋白抗原:
3周
多肽抗原:
5周
3.抗体制备
3.1动物免疫
免疫2只兔子 ,200ug/只(周期:1/2/2/(2)周)
8-10周
3.2动物取血
第三(四)次免疫后取少量动物血清,用于ELISA检测
3.3抗体纯化
过去交叉柱及抗原亲和纯化
4.抗体验证
抗体最终验证(ELISA检测)
《抗体验证结果汇报》
1周
5.客户获得
符合验证标准的纯化抗体20-50mg(蛋白抗原)/2mg(多肽抗原)/1mg(修饰性多肽);每条抗原多肽各1 mg(多肽抗原路线);抗体验证数据报告
合计
蛋白抗原路线:12-14周
多肽抗原路线:14-16周
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